Detección de ADN de pneumocystis en tejido pulmonar de adultos fallecidos en accidentes sugiere
re-infecciones pulmonares después de la infección primaria.
Ponce CA 1 , Gallo M 2 , Bustamante R 1 , y Vargas S 1 .
1 Programa de Microbiología y Micología, Instituto de Ciencias Biomédicas, Facultad de Medicina Universidad de Chile y 2 Servicio Médico Legal de Santiago.
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La epidemiología de Pneumocystis solo ha podido comenzar a conocerse con el advenimiento de la biología molecular ya que Pneumocystis no puede cultivarse. Gracias a esta, se están reconociendo infecciones asintomáticas o estados de portación en individuos inmunocompetentes que, a diferencia de la neumonia del paciente inmunocomprometido, no son diagnosticables por microscopía. Asi, técnicas de análisis molecular han permitido identificar Pneumocystis en muestas de aspirado nasofaríngeo (ANF) de lactantes sanos menores de 6 meses; en ANF en hasta el 40% de adultos inmunocompetentes con patología pulmonar diversa; y mas recientemente en ANF del 20% del personal administrativo de 1 hospital en España. Los reportes en muestras no-invasivas de adultos solo indican portación, a diferencia de los reportes en lactantes en quienes la infección primaria se ha documentado en el pulmón por histología y mediante detección de aumento de citokinas y otros productos de inflamación. La infección por Pneumocystis se localiza en el pulmón y la hipótesis que el ser humano presenta re-infecciones pulmonares por Pneumocystis a edades posteriores a la infección primaria se ha intentado demostrar previamente sin éxito. Se recolectaron muestras de pulmón de 12 adultos fallecidos por accidentes o violencias cuya necropsia se realizó en el SML. Se obtuvo 4 a 8 muestras de 0.5 gr cada una, del lóbulo superior derecho de cada fallecido (total 69 muestras). Después de utilizar sin éxito múltiples formas de procesamiento de las muestras se procedió a concentrar los extractos de tejido pulmonar con lo que de logró demostrar Pneumocystis en 6 (50%) de los casos. Pneumocystis se demostró por PCR-anidada con partidores pAZ102-E y pAZ102-H, que corresponden al gen que codifica la subunidad mayor mitocondrial del rRNA (mt LSU rRNA) de Pneumocystis y amplifican cualquier Pneumocystis sp. , y partidores internos pAZ102-X y pAZ102-Y que son específicos para Pneumocystis de origen humano. Este trabajo es la primera documentación de ADN de Pneumocystis en pulmones de adultos presumiblemente inmuno competentes. Para lograrlo fue necesario combinar técnicas de concentración de tejido pulmonar con técnicas sensibles de biología molecular lo que indica que la carga infectante es muy baja. Dado que Pneumocystis no produce normalmente latencia, estos resultados sugieren que el ser humano presenta re-infecciones pulmonares posteriores a la infección primaria.
Proyecto Fondecyt 1060750. |